一张 Figure,绑定多次生物学重复
完成代表性 Figure 后,为各条带关联其他重复,统一定量、汇总与原始数据导出。
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从操作到结果,清楚展示每一步
一张 Figure 关联多次重复
保留代表图,各次重复分别核对目标、内参与样本泳道。
逐样本查看定量与统计
查看独立样本散点、均值与 SD,选择实际实验设计和统计方法,点击“计算统计结果”。
按指标导出重复原图
一起整理各次原图、配套图片与计算记录。
开始使用这项功能
绑定其余重复
先完成一张代表性 Figure。打开“绑定生物学重复”,为每条目标和内参条带从图片库选择其余重复图片,可多选。
确认样本与对应关系
按重复核对目标、内参和泳道。相同组名可以复用,但要确认每个样本、膜来源与泳道顺序。Marker 和空孔不作为样本。
定量、查看统计与导出
进入“生物学重复灰度分析”,检查自动泳道与背景建议后计算。查看逐样本散点、汇总及适用的统计建议。导出结果,或使用“导出生物学重复原始数据”按指标导出各次重复原图。
新版操作图解
以下为 Windows 2.1.3 的实际操作截图,使用模拟素材。点击图片可放大查看。
打开样例,查看导出结果
查看三次重复合成样例
由2.0.0候选界面实际导出,算法 native-local-bg-v3。样例含两个目标及各自内参、两组与三次合成重复标签,保留逐样本测量、比值和来源。原文件包包含人工生成的PNG和来源清单。样例只展示计算与来源对应,不代表真实实验或生物学结论。
使用与结果说明
每次重复分别对应内参
按实际样本身份核对每次重复的目标、内参和泳道顺序。Marker、空孔与缺失样本保留原状,不借用其他膜或邻近泳道补齐。
三个文件不一定是三个生物学重复
同一样本的重复曝光、重复扫描或重复上样属于技术层面的重复。独立样本数由实际实验决定。未知或缺失的对应关系保持待确认,不自动补齐。
不同日期的 WB 怎么汇总
先分别计算每个样本的目标/对应内参比值。需要相对对照表达时,再选择明确的对照基准,并保留采用整体对照均值还是每次实验对照的记录。归一化不会自动消除跨膜或批次差异。
显示换算与统计分开
显示可选“目标/对应内参”“以全部对照均值为1”或“以各次自己的对照为1”。图中保留独立样本散点、均值与SD。统计默认分析原比值,逐次被归一成1的自身对照值不会被当成没有方差的独立样本。
原始数据按指标排列
例如先排列 TNF-α 的第1、2、3次重复及各自配图,再排列 IL-6。保留原图身份和每条泳道的引用。同一原图可去重保存,不同膜的图片分别展示。
结果怎样带到作图软件
“复制数据”可直接粘贴到Excel或Prism。“导出Excel”保留多表计算与来源记录。正式重复分析还可选择PDF报告、PPTX报告或含清单的原文件包。信息不全时导出带缺项标记的草稿,补齐并核对后再生成正式报告。
选择统计方法前
先说明独立还是配对设计、哪些是技术重复、每组 n 和缺失值。图中保留每个独立样本的点,图示误差线为 SD。建议不会替代实验设计,也不会把重复曝光当作额外样本。




