细胞凋亡 · 抗体测评
XIAP
ABclonal · A20846
背景较干净；全长逐渐减少，约 30 kDa 的条带逐渐增强。
01实验图片
泳道分组
- 泳道 1
- 0 min
- 泳道 2
- 5 min
- 泳道 3
- 15 min
- 泳道 4
- 30 min
- 泳道 5
- 60 min
- 泳道 6
- 120 min
02本次观察
条带和背景的表现
这支 XIAP 抗体整体效果很好，背景较干净，只有少量杂带。全长条带和低分子量条带的变化都比较容易辨认。
全长下降，小条带增加
随凋亡刺激时间延长，全长 XIAP 逐渐减少，与此同时约 30 kDa 的条带逐渐增强。到 2 h 时，配套的 Caspase-3、GSDME 检测已出现明显活化和剪切，这组 XIAP 的时间趋势也很清楚。
03蛋白背景
XIAP 是凋亡抑制蛋白家族成员，全长理论分子量约为 57 kDa，WB 中常见于约 53–57 kDa。它可直接抑制 Caspase-3、Caspase-7 和 Caspase-9，并具有 E3 泛素连接酶活性，参与细胞存活与死亡的调节。凋亡过程中，XIAP 的蛋白水平和加工状态可能发生变化，表现为全长条带减弱或出现较小条带。不同抗体识别的区段不同，所呈现的片段和强度也会不同。
04本次实测条件
- 样本
- 人 THP-1 单核细胞
- 应用
- Western blot（WB）
- 一抗稀释
- 1:3000（本次实测）
- 凝胶
- 4–12% 胶
- 电泳
- 200 V，40 min
- 转膜
- 320 mA，30 min
- 膜
- 0.2 μm NC 膜
- 封闭
- 不封闭
- 二抗
- 1:5000，1 h
- 上样量
- 15 μL（体积；蛋白质量未记录）
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