细胞凋亡 · 抗体测评
cIAP1
ABclonal · A19688
用了一年多，背景干净；在几种细胞死亡模型里都能看到 cIAP1 下降。
01实验图片
泳道分组
- 泳道 1
- 0 min
- 泳道 2
- 5 min
- 泳道 3
- 15 min
- 泳道 4
- 30 min
- 泳道 5
- 60 min
- 泳道 6
- 120 min
02本次观察
用了一年多的感受
这支抗体我用了一年多，整体效果很好。目标条带清楚，背景比较干净，其他条带不多，观察蛋白水平变化比较省心。
时间越长，cIAP1 越低
这组凋亡刺激实验里，cIAP1 随刺激时间延长逐渐下降。到 2 h 时，配套检测中的 Caspase-3、GSDME 已经有明显的活化和剪切，而 cIAP1 的信号在减弱。
其他模型中的体验
目前我在多种细胞死亡模型中，也都能用这支抗体比较稳定地看到 cIAP1 蛋白水平下降。对我来说，它的优点是背景干净、趋势容易读。
03蛋白背景
cIAP1 由 BIRC2 编码，全长理论分子量约为 70 kDa，参与细胞存活、炎症和死亡信号调节。它主要作为 E3 泛素连接酶，调控 RIPK1 等蛋白的泛素化，并影响 NF-κB 及 TNF 相关信号。受到特定刺激或 IAP 拮抗剂作用时，cIAP1 可发生降解，改变细胞对死亡信号的反应。因此，WB 中常用全长条带来观察其蛋白水平变化，再与同一时间点的 Caspase、GSDME 等条带对照。
04本次实测条件
- 样本
- 人 THP-1 单核细胞
- 应用
- Western blot（WB）
- 一抗稀释
- 1:3000（本次实测）
- 凝胶
- 4–12% 胶
- 电泳
- 200 V，40 min
- 转膜
- 320 mA，30 min
- 膜
- 0.2 μm NC 膜
- 封闭
- 不封闭
- 二抗
- 1:5000，1 h
- 上样量
- 15 μL（体积；蛋白质量未记录）
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