细胞凋亡 · 抗体测评
BCL2
碧云天 · AG1225
用了约三年，目标条带依然清楚、背景干净；这组实验中 BCL2 基本稳定。
01实验图片
02本次观察
用了三年的老抗体
这支 BCL2 抗体我用了约 3 年，效果依然很好。目标条带明显，背景很干净，基本没有明显杂带，是这次测评里使用体验不错的一支。
2 h 时 BCL2 仍然稳定
到 2 h 时，配套检测的 Caspase-3、GSDME 已经出现明显活化和剪切，BCL2 总蛋白却基本稳定。这组结果里没有看到明显下降，观察凋亡相关变化时，也可以把这个差别放在一起看。
03蛋白背景
BCL2 是 BCL2 家族的抗凋亡成员，全长条带通常约为 26 kDa。它通过与家族中的促凋亡蛋白相互作用，限制线粒体外膜通透化和细胞色素 c 释放，帮助细胞抵抗凋亡刺激。BCL2 的作用既受到蛋白丰度影响，也与结合伙伴和磷酸化等修饰有关。因此，短时间刺激后，总 BCL2 条带可能变化不大；延长取样时间或采用不同刺激条件时，则可能看到不同的表达趋势。
04本次实测条件
- 样本
- 人 THP-1 单核细胞
- 应用
- Western blot（WB）
- 一抗稀释
- 1:3000（本次实测）
- 凝胶
- 4–12% 胶
- 电泳
- 200 V，35 min
- 转膜
- 300 mA，30 min
- 膜
- 0.2 μm NC 膜
- 封闭
- 1% PVP，1 h
- 二抗
- 1:8000，1 h
- 上样量
- 未记录
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